利用Aptamer功能化的微粒对蛋白质进行声流分离。

ty10086 提交于 周三, 08/25/2021 - 15:45
文章英文标题
Acoustofluidic Separation of Proteins Using Aptamer-Functionalized Microparticles.
正文
我们提出了一种声流控分离微通道内与核酸适配体包被微粒结合的蛋白质的方法。利用斜指叉指换能器( SFIT )产生的行波声表面波( TSAWs )通过TSAW驱动的声辐射力( ARF )分离不同尺寸的载蛋白微粒,该声流控装置由SFIT沉积在压电铌酸锂基片上和PDMS微流控通道组成。在PDMS微通道内,基底上传播的TSAWs渗透到样品流体中,悬浮在样品流体中的人蛋白结合的微粒。微颗粒受到TSAW驱动的ARF的作用,其大小取决于它们的大小,从而沿着不同的流线流动,导致蛋白质的三分离。在本工作中,我们利用两种不同尺寸的链霉亲和素功能化聚苯乙烯( streptavidin-functionalized聚苯乙烯,PS )微粒捕获了两种适配子( apt15和aptD17.4 ),并分别标记了相应的生物素分子。适配体的生物素末端通过链霉亲和素-生物素连接到微粒上,而适配体的游离末端用来捕获凝血酶( th )和免疫球蛋白E ( IgE )的靶蛋白,得到的PS-apt15 - th和PS-aptD17.4 - IgE复合物以及mCardinal2用于人蛋白的声流式三分离实验演示。我们首次在所提出的声流控装置中通过TSAW驱动ARF实现了3种蛋白( th、IgE和mCardinal2 )的同时分离。
文章内容(英文)
We propose an acoustofluidic method for the triseparation of proteins conjugated with aptamer-coated microparticles inside a microchannel. Traveling surface acoustic waves (TSAWs) produced from a slanted-finger interdigital transducer (SFIT) are used to separate the protein-loaded microparticles of different sizes via the TSAW-driven acoustic radiation force (ARF). The acoustofluidic device consists of an SFIT deposited onto a piezoelectric lithium niobate substrate and a polydimethylsiloxane (PDMS) microfluidic channel on top of the substrate. The TSAWs propagating on the substrate penetrate into the sample fluid flow, where the human protein-conjugated microparticles are suspended, inside the PDMS microchannel. The microparticles are subjected to the TSAW-driven ARF with varying magnitude depending on their size and thus flow along different streamlines, leading to triseparation of the proteins. In this work, we used two different-sized streptavidin-functionalized polystyrene (PS) microparticles to capture two kinds of aptamers (apt15 and aptD17.4), which were labeled with a respective biotin molecule at one end. The biotin ends of the aptamers were attached to the microparticles through streptavidin-biotin linkage, whereas the free ends of the aptamers were used to capture their target proteins of thrombin (th) and immunoglobulin E (IgE). The resultant PS-apt15-th and PS-aptD17.4-IgE complexes, as well as mCardinal2, were used for experimental demonstration of acoustofluidic triseparation of the human proteins. We achieved simultaneous separation of proteins of three kinds (th, IgE, and mCardinal2) for the first time via the TSAW-driven ARF in the proposed acoustofluidic device.
来源出处
Journal|[J]Analytical Chemistry2021.
DOI
https://doi.org/10.1021/ACS.ANALCHEM.1C01198

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