模拟性侵犯样本中精子细胞的声学捕获

ty10086 提交于 周四, 08/26/2021 - 13:13
文章英文标题
Acoustic trapping of sperm cells from mock sexual assault samples
正文
摘要\n我们报道了利用一种新颖的声学差异提取( ADE )技术从模拟性攻击样本的相关成分中成功分离出精子细胞。用玻璃和聚二甲基硅氧烷( PDMS )在非光刻工艺中制备的多层微流控装置能够与定制的仪器接口,利用驻波捕获含有大量上皮细胞的样品中的单个精细胞。从颊、阴道拭子中产生样本,模拟生后阴道拭子,通过ADE系统处理后,用自定义短串联重复( STR )化学方法提取扩增DNA的捕获细胞DNA。原型声学捕获技术完全能够从雌雄DNA质量不同的模拟样本中分离出完整的精子细胞。其他生物成分被评价对精子细胞捕获的不利影响,包括血液、酵母和细菌(大肠杆菌),这些对观察到的精子细胞捕获的影响微不足道。最后,我们演示了从模拟样本中成功捕获精子细胞,其中含有超过精子细胞40倍的女性上皮细胞。用18 - plex扩增试剂盒对分离后的雄性部分STR位点进行PCR扩增,确定精子细胞纯化的有效性,得到雄性特异性图谱。
文章内容(英文)
Abstract(#br)We report the successful separation of sperm cells from a relevant composition of mock sexual assault samples using a novel acoustic differential extraction (ADE) technology. A multi-layer microfluidic device fabricated in a non-photolithographic process from glass and polydimethylsiloxane (PDMS) was capable of interfacing with custom-built instrumentation to exploit a standing acoustic wave for the trapping of individual sperm cells in a sample containing an abundance of epithelial cells. Samples were generated from buccal and vaginal swabs to mimic post-coital vaginal swabs, and processed through the ADE system followed by DNA extraction of the captured cells with amplification of DNA using a custom short tandem repeat (STR) chemistry. The prototype acoustic trapping technology was fully capable of isolating intact sperm cells from mock samples with disparate masses of male and female DNA. Other biological components were evaluated for adverse effects on sperm cell trapping, including blood, yeast, and bacteria ( E. coli ), and these had negligible effects on observed sperm cell trapping. Finally, we demonstrate the successful capture of sperm cells from mock samples containing a 40-fold excess in female epithelial cells over sperm cells. The effectiveness of sperm cell purification was ascertained with polymerase chain reaction (PCR) amplification of STR loci from the male fraction post separation with an 18-plex amplification kit, which resulted in male-only profiles.
来源出处
Journal|[J]Forensic Science International: GeneticsVolume 41, 2019. PP 42-49
DOI
https://doi.org/10.1016/j.fsigen.2019.03.012

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